MBT新型コロナ感染対策の研究結果について

還元発酵乳酸菌エキスに新型コロナウイルスを９：１の割合で接種し、室温20～25℃で1分および10分 静置しました。反応を停⽌させ、回収液を⽤いてウイルス感染価をプラーク法にて算出しました。なお全試験は、本学内のバイオセーフティレベル３(BSL3)の実験施設において、適切な病原体封じ込め措置のもとに⾏いました。

還元発酵乳酸菌エキスは8.25 x 10⁶ PFU/ml から1 分後で＜1.50 x 10³ PFU/ml（減少率＞99.981%）と検出限界まで感染価が減少しました。           

図１．還元発酵乳酸菌エキスによるウイルス感染価の推移

本試験で使⽤した還元発酵乳酸菌エキスは新型コロナウイルス（SARS-CoV-2）を速やかに不活化することが判明しました。なお、浮遊するウイルス、人体での効果・影響を検証したものではないため、予防効果および既に感染した体内のウイルス減少や治療に関して実証したものではありません。

微生物感染症学講座･矢野寿一教授、中野竜一准教授の研究グループは、合同会社STHからの受託研究により、光触媒（CLEANEST NFE2）加⼯プラスチック板が新型コロナウイルス（SARS-CoV-2）を不活化することを確認しました。

光照射保管した２種類の試験品に新型コロナウイルスを接種し、白色蛍光灯1000lx(<380nmのUVカット)下に静置しました。それぞれ0.5時間、2時間、4時間の作⽤時間後、PBS 液を用いてウイルスを回収し、ウイルス感染価（PFU/mL）をプラーク法にて算出しました。なお全試験は、本学内のバイオセーフティレベル３(BSL3)の実験施設において、適切な病原体封じ込め措置のもとに⾏いました。

光触媒（CLEANEST NFE2）加⼯プラスチック板では、0.5時間の接触で4.05 x 10⁵ PFU/mL から検出限界の2.50 x 10² PFU/mL（減少率＞99.916%）未満へと感染価が減少しました。⼀⽅、光触媒未加⼯プラスチック板においても、2時間で2.75 x 10⁴ PFU/mL と若⼲の感染価の減少が⾒られました。           

図１．ウイルス感染価の推移

本研究で使用した光触媒（CLEANEST NFE2）は、新型コロナウイルス（SARS-CoV-2）に接触させることにより不活化することが判明しました。また、光触媒未加工プラスチック板においても感染価の減少が見られたことから、プラスチック素材そのものにも抗ウイルス活性があることが示唆されました。本試験品を使用することにより、物質の表面についた新型コロナウイルスによる接触感染防止に有効である可能性が考えられました。なお、空間に浮遊するウイルスへの効果、人体への影響については検証を行っておりません。

試験品の噴出⼝を対象から1 mm の距離になるように設置し、ウイルスを接種したプラスチックシャーレと繊維（ポリエステルの布地、綿⽚）にスチームを5 秒または10 秒噴射しました。作⽤時間後、回収液（PBS もしくはDMEM）を⽤いてウイルスを回収し、ウイルス感染価（PFU/mL）をプラーク法にて算出しました。3 ⽇培養後に細胞を観察し、ウイルス感染価ならびにウイルスの不活化効果を算出しました。なお全試験は、本学内のバイオセーフティレベル３(BSL3)の実験施設において、適切な病原体封じ込め措置のもとに⾏いました。

スチーマーを新型コロナウイルスに照射すると、 プラスチックシャーレ、ポリエステルの布地、綿⽚とも5 秒の噴射で検出限界の5.00 x 10¹ PFU/ml 未満へと感染価が減少しました。

図１．スチーマーによるウイルス感染価の推移

本試験で使⽤した家庭⽤スチーマー⾐類⽤ (Laurastar Iggi Steam Iron)は、新型コロナウイルス（SARS-CoV-2）を不活化することが判明しました。本試験器を⽤いることにより、物質や繊維の表⾯についた新型コロナウイルスによる接触感染防⽌に有効である可能性が考えられました。なお、浮遊するウイルスへの効果、⼈体への影響については検証を⾏っていません。

密閉されたデシケータにウイルス付着のシャーレを静置し、バスター8から発⽣するオゾンを約10 ppm に調整し、10分、30分および60分曝露させました。密閉空間の中には試験⽚は1 つのみ設置し、曝露時間終了後に取り出した試験⽚にSCDLP培地を滴下させ、セルスクレーパーを⽤いてウイルスを回収し、ウイルス感染価（PFU/mL）をプラーク法にて測定しました。なお全試験は、本学内のバイオセーフティレベル３(BSL3)の実験施設において、適切な病原体封じ込め措置のもとに⾏いました。

バスター８から発生したオゾンガスを新型コロナウイルスに曝露させると、1.15 x 10⁷ PFU/mLから10分で5.80 x 10⁵ PFU/mL（減少率90.720%）、30分で8.55 x 10⁴ PFU/mL（減少率98.632%）、60分で2.70 x 10⁵ PFU/mL（減少率99.950%）となり、不活化を確認しました。

図１．バスター8から発生するオゾンガスによるウイルス感染価の推移

本試験で使⽤したバスター8 で⽣成したオゾンガスは、新型コロナウイルス（SARS-CoV-2）を不活化することが判明しました。本試験器でオゾンガスの空間噴霧を行うことにより、物質の表⾯についた新型コロナウイルスによる接触感染防⽌に有効である可能性が考えられました。なお、浮遊するウイルスへの効果、⼈体への影響については検証を⾏っていません。

密閉されたデシケータにウイルス付着のシャーレを静置し、オゾンエアーサラス (SA-1)から発⽣するオゾンを0.05ppm、オゾンエアーフィーノ (VS-50S) から発⽣するオゾンを約0.05ppmに調整し、それぞれ16 時間曝露させました。密閉空間の中には試験⽚は1 つのみ設置し、曝露時間終了後に取り出した試験⽚にSCDLP 培地を滴下させ、セルスクレーパーを⽤いてウイルスを回収し、ウイルス感染価（PFU/mL）をプラーク法にて測定しました。なお全試験は、本学内のバイオセーフティレベル３(BSL3)の実験施設において、適切な病原体封じ込め措置のもとに⾏いました。

図１．オゾンエアーサラス (SA-1)から発生するオゾンガスによるウイルス感染価の推移

 オゾンエアーフィーノ (VS-50S) から発⽣するオゾンガスを新型コロナウイルスに曝露させると、1.15 x 10⁷PFU/mL から16 時間後に検出限界の＜1.00 x 10² PFU/mL（減少率＞99.997%）まで感染価が減少しました。

図２．オゾンエアーフィーノ (VS-50S) から発⽣するオゾンガスによるウイルス感染価の推移

図１．オゾンによるウイルス感染価の推移

⾷塩濃度0.9%のオゾンナノバブル⽔と⾷塩濃度1.8%のオゾンナノバブル⽔を新型コロナウイルスに5分接触させると、1.0 x 10⁷PFU/ml からそれぞれ2.7 x 10⁵PFU/ml（減少率97.404％）, 1.6 x10⁴PFU/ml（減少率99.850％）へと感染価が減少しました。10 分の接触ではさらに減少し、それぞれ1.1 x 10⁵PFU/ml（減少率98.238％）, 4.5 x 10²PFU/ml（減少率99.993％）となりました（図1）。

図１．オゾンナノバブル水によるウイルス感染価の推移

光照射条件500lxでは、光照射保管および暗所保管した試験品とも、時間経過とともに感染価が減少し、1時間で90%以上、4時間で99%以上の減少率を示しました。さらに6時間作用させると、99.806%の感染価の減少を示しました（図１）。
暗所条件0lxにおいても、光照射保管および暗所保管した試験品とも、時間経過とともに感染価が減少し、1時間で90%以上、2時間で99%以上の減少率を示しました。さらに6時間作用させると、光照射保管の試験品で99.559%、暗所保管の試験品で99.438%の感染価の減少を示しました（図２）。

図１．光照射条件500lxにおけるウイルス感染価の推移

図２．暗所条件0lxにおけるウイルス感染価の推移

光触媒未加工のガラス板にUV3W/cm²で照射すると、3.60 x 10⁵ PFU/mL から10 分後に検出限界の5.00 x 10¹PFU/mL 未満（減少率＞99.982%）まで感染価が減少しました。⼀⽅、光触媒加⼯のガラス板にUV3W/cm²で照射すると、10分後では2.02 x 10⁴ PFU/mL の感染価が残存しましたが、30 分後には検出限界の＜5.00 x 10¹PFU/mL 未満（減少率＞99.977%）まで感染価が減少しました（図１）。

図１．ウイルス感染価の推移

オゾンガスを新型コロナウイルス液に暴露すると、 反応前のウイルス感染価5.25 x10⁶ PFU/mlから12時間後に検出限界の＜1.00 x 10² PFU/ml（減少率 ＞99.996%）まで感染価が減少しました（図1）。

図1.オゾンガスによるウイルス感染価の推移

ボックス内のオゾンガス濃度の推移は図1のとおりであり、オゾンガスを4.75 x10⁶ PFU/mlの新型コロナウイルスに暴露させると、30分で2.98 x 10⁵ PFU/ml（減少率91.500%）、60分で5.50 x 10⁴ PFU/ml（減少率98.428%）へと感染価が減少しました（図2）。

図1.ボックス内のオゾンガス濃度推移

図2.オゾンガスによるウイルス感染価の推移

オゾン水を新型コロナウイルス液に混合すると、 反応前のウイルス感染価1.49 x10⁶ PFU/mlが、30秒後に2.75 x 10³ PFU/ml（減少率99.784%）へ、60秒後には＜2.00 x 10² PFU/ml（減少率 ＞99.983%）へと検出限界以下まで感染価が減少しました（図1）。

図1.オゾン水によるウイルス感染価の推移

【試験１】シャーレに新型コロナウイルス液を付着させ、トレビ・クリアゼロ「FWO-3」を2回噴霧し15秒、60秒及び3分静置させました。コントロールとして、PBS（リン酸緩衝食塩水）を2回噴霧し15秒、60秒及び3分静置させました。反応後、チオ硫酸ナトリウム混合回収液にて反応を停止させ、ウイルス感染価（PFU/mL）をプラーク法にて算出しました。

【試験２】新型コロナウイルス液をトレビ・クリアゼロ「FWO-3」で生成したオゾン水と混合させ、15秒及び60秒反応させました。コントロールとして、PBS（リン酸緩衝食塩水）とウイルス液を同様に混合させ、15秒及び60秒反応させました。反応後、チオ硫酸ナトリウム混合回収液にて反応を停止させ、ウイルス感染価（PFU/mL）をプラーク法にて算出しました。

なお全試験は、本学内のバイオセーフティレベル３(BSL3)の実験施設において、適切な病原体封じ込め措置のもとに行ないました。

【試験１】オゾン水を新型コロナウイルスに噴霧すると、 1.69 x10⁶PFU/mlから15秒後に1.15 x 10⁴ PFU/ml（減少率99.098%）、60秒後に1.75 x 10³ PFU/ml（減少率99.844%）、3分後には1.25 x 10² PFU/ml（減少率99.988%）と検出限界以下まで感染価が減少しました（図１）。

図１．オゾン水噴霧によるウイルス感染価の推移

【試験２】オゾン水と新型コロナウイルスを混合すると、9.75 x 10⁶ PFU/mlから15秒後に4.30 x 10⁵ PFU/ml（減少率95.425%）、60秒後に1.20 x 10⁵ PFU/ml（減少率98.769%）へと感染価が減少しました（図２）。

図２．オゾン水混合によるウイルス感染価の推移

空間に浮遊するウイルスへの噴霧による効果、人体への影響については、実験を行っていない。

飛沫感染、飛沫核（空気）感染及びマスクを使用した場合の人体への影響（感染確率等）については、実験を行っていない。